特异性核酸扩增是核酸检测技术的基础。以PCR反应为基础的核酸扩增检测技术已发展成熟并广泛应用，但一直存在设备及人员依赖度高的问题。重组酶聚合酶扩增（RPA）技术借鉴T4噬菌体DNA的重组复制过程开发而来，是继T4连接酶、T4 DNA聚合酶等之后，T4噬菌体研究对生物技术和生物工具领域的又一大贡献。RPA检测技术对设备及操作人员的专业度要求很低，保持了核酸检测固有的高特异性及高灵敏度，能够实现快速检测，是PCR类核酸检测技术的良好补充，尤其在疾病即时诊断（POCT）和食品安全、公共卫生的现场检测（in-field detection）中有巨大应用前景。在重要病原体检测方面，RPA技术已有较多应用，包括鼠疫、炭疽、埃博拉病毒、MERS的检测等。由于RPA的等温扩增特性及固有的高灵敏度，其检测应用带有来自引物二聚体的内源性假阳性风险。本项目针对RPA核酸检测的这个短板开展了系列研究，向领域内提出了来自引物二聚体的内源性假阳性风险，并寻找消除该风险的一般规律。这项研究有助于RPA技术更好的应用于实际检测，目前已发表系列研究论文4篇，申报国家发明专利10件。其中首篇论文于2019年12月被国际知名期刊Frontiers in Microbiology接收，另外3篇论文也于2020年第一季度分别被Frontiers in Microbiology、BMC Veterinary Research和Journal of Food Science这3个国际知名期刊接收。该检测技术对于新型冠状病毒SARS-CoV-2的大规模核酸检测具有很好的应用前景，比现有的qPCR技术更先进、简便、快速。。

 

成果形式：新技术、新工艺

 

技术指标：

 

检测时间小于30分钟；

 

检测灵敏度在1-20拷贝之间；

 

与非目标病原无交叉反应。

 

创新点：该技术具有快速、灵敏、简便、特异性和灵敏性高等特点，可应用于食源性微生物和畜牧、渔业养殖致病病原的现场检测。

 

成熟程度：成熟

 

合作方式：技术开发、技术咨询、技术服务