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限制性内切酶制备关键技术研究
2023-11-02 19:00  

  限制性内切酶(简称限制酶)是基因工程中的基础工具,广泛应用于二代测序、医疗诊断、食品检测和农业遗传育种等领域。限制酶由于自身特点,其制备具有较高的技术难度,多年来被美国New England Biolabs公司、美国赛默飞世尔公司和日本Takara Bio公司垄断,是我国生物技术领域的一项“卡脖子”技术。本研究成果,发表科技论文2篇,申报国家发明专利5件(目前获得授权1件),形成快速限制酶品种40余种,在品种数量上超过了日本Takara Bio公司,列世界第三位;限制酶量产制备技术是国内唯一。

 

成果形式:新技术、新工艺

 

技术指标:

 

5-15分钟内完成快速酶切;

 

通用缓冲液;

 

无星号活性;

 

高酶活冗余度;

 

反应体系兼容下游实验。

 

创新点:限制性内切酶(简称限制酶)由于自身特点,其制备具有较高的技术难度,包括:(1)限制酶包含200多个品种,来源完全不同,相互之间无直接关联,研发工作无法举一反三;(2)限制酶可切断DNA,对于表达宿主细胞是毒性蛋白,大量表达十分困难。本研究通过开发以下技术解决上述问题:(1)构建和筛选一系列高表达工程菌株;(2)研究提高限制酶比活力的分子机理;(3)建立操作简便、判断标准明晰的质量控制体系。

 

成熟程度:成熟

 

合作方式:技术开发、技术咨询、技术服务

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